abraxis 520011說明書

Microcystins/Nodularins (ADDA) (EPA ETV) (EPA Method 546), ELISA, 96-test

微囊藻毒素/結核

菌素（ADDA）（EPA ETV）（EPA方法546），ELISA，96試驗

微囊藻毒素-ADDA ELISA是一種用于定量檢測水樣中微囊藻毒素和結節蛋白的靈敏性的免疫測定方法。

該測試適用于定量和/或定性檢測水樣中的微囊藻毒素和結核菌素[請參考適當的技術公告，以收集，處理和處理飲用水（處理過的和未經處理的）和休閑用水樣品。如有必要，可以通過HPLC，蛋白磷酸酶測定或其他常規方法確認陽性樣品。該測試是一種間接競爭性ELISA，用于微囊藻毒素和Nodularins的同源基因獨立檢測。它基于對微囊藻毒素，結節蛋白及其同系物的特異性抗體識別。當樣品中存在毒素時，毒素和固定在板上的微囊藻毒素-蛋白質類似物競爭溶液中抗微囊藻毒素/結節菌素抗體的結合位點。然后洗滌板，并添加第二抗體-HRP標記。在第二洗滌步驟和加入底物溶液之后，產生顏色信號。藍色的強度與樣品中微囊藻毒素的濃度成反比。在時間后停止顯色反應，并使用ELISA讀數器評估顏色。使用每次運行構建的標準曲線通過內插法確定樣品的濃度。

編號520011

格式：96孔板ELISA

微咸水或海水中的微囊藻毒素樣品制備

1. 預期用途

用于制備用于 Abraxis 微囊藻毒素-ADDA ELISA 分析的微咸水或海水樣品。

2. 靈敏度

在微咸水或海水中為 0.263 ppb

3. 材料和試劑提供一次性 5¾”玻璃巴斯德吸管一次性 9”玻璃巴斯德吸管玻璃棉

巴斯德吸管燈泡

微囊藻毒素-ADDA 海水樣品處理液微囊藻毒素-ADDA 海水樣品凈化樹脂

4. 所需的其他材料（未提供）

12 x 75 mm 試管

20 mL 玻璃小瓶，帶有聚四氟乙烯內襯蓋，去離子水或蒸餾水

帶特氟龍內襯蓋的 4 mL 玻璃小瓶 Scoopula

帶一次性塑料槍頭的微量移液器渦旋混合器

Abraxis 微囊藻毒素-ADDA ELISA 試劑盒

5. 注釋和注意事項

本程序預期用于微咸水或海水樣品。其他基質在用于本程序前應進行*驗證。

6. 色譜柱制備程序

6.1 將少量玻璃棉放入 5¾”玻璃巴斯德吸管頂部。使用 9" 玻璃巴斯德移液器，將玻璃棉推入 5¾" 移液器底部，形成色譜柱底部。玻璃棉的深度應約為 5 mm。將色譜柱置于 12 x 75 mm 試管中。

6.2 每個色譜柱將需要約 1.5 g 海水樣品清除樹脂。計算微囊藻毒素-ADDA 海水樣品凈化樹脂的適量并加至 20 mL 玻璃瓶中。

6.3 以約 2:1 的比例向微囊藻毒素-ADDA 海水樣品清除樹脂中加入蒸餾水或去離子水（例如，每 5 g 樹脂中加入 10 mL 去離子水或蒸餾水）。搖動或投票。

6.4 使用 9" 巴斯德吸管將樹脂水溶液移取至色譜柱中。將移液器吸頭保持在柱床表面，避免在柱床中形成氣泡。在距離移液器頂部約 2 cm 處，將色譜柱填充至壓痕處。這將產生一個約 8 cm 的色譜柱。

6.5 使去離子水或蒸餾水從色譜柱中排出。  在管中水面以上至少 1 cm 處提起色譜柱。將移液器燈泡靠在色譜柱頂部（不要將燈泡連接到色譜柱上），將剩余的水推出色譜柱。避免

使色譜柱的頭端與管中的水接觸，以防止水吸入回色譜柱中。

6.6 將色譜柱置于適當標記的 4 mL 玻璃瓶中。

7. 樣品清理

7.1 向潔凈、適當標記的 4 mL 玻璃瓶中加入 1 mL 微咸水或海水樣品。加入 50µL 微囊藻毒素-ADDA 海水樣品處理溶液。渦旋。

7.2 向色譜柱頂部加入 375 μL 經處理的微咸水或海水樣品。使樣品流過色譜柱并收集在小瓶中。

7.3 向色譜柱中再加入一份 375 μL 經處理樣本。流過色譜柱。

7.4 在小瓶中樣品表面上方至少 1 cm 處提起色譜柱。將移液器燈泡靠在色譜柱頂部（不要將燈泡連接到色譜柱上），將剩余樣品推出色譜柱。避免色譜柱與小瓶中的樣品接觸，以防止樣品被抽吸回色譜柱中。

7.5 將色譜柱放回小瓶中。向色譜柱頂部加入 500 μL 蒸餾水或去離子水。使沖洗液流過色譜柱，并與樣品一起收集。

7.6 將色譜柱頂端抬高至樣品表面上方至少 1 cm 處/小瓶中沖洗液中。將移液器燈泡靠在色譜柱頂部（不要將燈泡連接到色譜柱上），將剩余的沖洗液推出色譜柱。避免色譜柱與小瓶中的樣品接觸，以防止樣品被抽吸回色譜柱中。

7.7 取出色譜柱并丟棄（色譜柱僅供一次性使用）。蓋上小瓶并渦旋。然后可以使用 Abraxis 微囊藻毒素-ADDA ELISA 試劑盒分析樣品。

8. 結果評價

將 ELISA 結果乘以因子 1.75，測定樣品中微囊藻毒素的濃度。濃度低于標準品 1 (0.15 ppb) 的樣品應報告為含有 < 0.263 ppb 的微囊藻毒素。濃度高于標準品 5 (5.0 ppb) 的樣品可報告為含有

> 8.75 ppb 微囊藻毒素或進一步稀釋并重新分析以獲得準確的定量結果。

9. 性能數據

恢復

用如上所述制備的微囊藻毒素-LR、微囊藻毒素-LA 或微囊藻毒素-RR 加標含不同濃度海水的樣品，然后使用微囊藻毒素-ADDA 試驗進行分析。微囊藻毒素-LR 的平均回收率為 91.7%。Microcystin-LA 的平均回收率為 92.1%。微囊藻毒素-RR 的平均回收率為 98.9%。