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advancedbiomatrix PureCol說(shuō)明書(shū)
目錄 #5005
PureCol ®是一種 3 mg/ml 的 I 型牛去端膠原溶液，用于 2D 和 3D 細(xì)胞培養(yǎng)，或作為膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品。PureCol ®被稱(chēng)為膠原蛋白產(chǎn)品的純度標(biāo)準(zhǔn)（≥99.9% 的膠原蛋白含量）、一致性和可重復(fù)性，并被超過(guò) 2000 篇出版物引用
PureCol ®膠原蛋白被稱(chēng)為所有膠原蛋白的純度標(biāo)準(zhǔn)（> 99.9% 的膠原蛋白含量）、功能性和最天然的膠原蛋白。PureCol ®是從來(lái)自美國(guó)受控的封閉畜群的牛皮中分離出來(lái)的。Advanced BioMatrix 的制造工藝符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，這些標(biāo)準(zhǔn)已被證明可以產(chǎn)生批次間一致性。
PureCol ®膠原蛋白含有大約 97% 的 I 型去端膠原蛋白，其余由 III 型膠原蛋白組成。PureCol ®膠原蛋白的供應(yīng)濃度約為 3 mg/ml。每個(gè)特定批次的濃度都在分析證書(shū)上提供，該證書(shū)可在購(gòu)買(mǎi)每種產(chǎn)品時(shí)獲得。PureCol ®是在 0.01 N HCl 中可溶的去端膠原蛋白，因此 pH 值為 2。 PureCol ®膠原蛋白是理想的表面涂層，為培養(yǎng)細(xì)胞提供薄層制備，或用作固體凝膠。
PureCol ®膠原蛋白以用戶友好的包裝形式提供，便于使用和儲(chǔ)存。PureCol ®經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾，并作為即用型溶液提供。
| 參數(shù)、測(cè)試和方法 | PureCol ® I 型膠原蛋白 #5005 |
| 滅菌方法 | 過(guò)濾 |
| 提取方法 | 酶 - 去端膠原 |
| 形式 | 解決方案 |
| 包裝尺寸 | 100 毫升、1000 毫升 |
| 貯存溫度 | 2-10°C |
| 保質(zhì)期 | 自收到之日起至少 6 個(gè)月 |
膠原蛋白濃度 - 雙縮脲 | 2.9-3.2 毫克/毫升 |
膠原蛋白純度 - 銀染 | > 99.9% |
| 酸堿度 | 1.9-2.1 |
| 動(dòng)力學(xué)凝膠測(cè)試（分鐘） | < 40 |
| 凝膠形成管測(cè)試（分鐘） | < 40 |
原纖維生成（吸光度單位） | > 0.5 |
電泳圖案 - 考馬斯藍(lán) | 特征 |
| 無(wú)菌 - USP 修改 | 沒(méi)有增長(zhǎng) |
| 內(nèi)毒素 - 鱟 | < 1.0 歐盟/毫升 |
| 滲透壓 (mOsmo H2O/kg) | < 35 |
| 細(xì)胞附著試驗(yàn) | 經(jīng)過(guò) |
| 資源 | 牛皮 |
| 水凝膠楊氏模量 E (Pa) | 特征 |
涂裝程序
注意：使用這些建議作為指導(dǎo)來(lái)確定適合您的培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳包被條件。
從瓶子中取出所需數(shù)量的膠原蛋白并分配到稀釋容器中。
將 PureCol ® 在水中稀釋至 ~50 至 100 µg/ml (~1:30)。也可以使用 0.01 N HCl 溶液。
輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物，直到材料*混合。
將適量稀釋的 PureCol ® 材料添加到培養(yǎng)表面，確保整個(gè)表面都被包被。
在室溫下孵育，蓋上蓋子 1-2 小時(shí)。吸出任何剩余的材料。或者，在室溫下孵育直至表面干燥。
用無(wú)菌培養(yǎng)基或 PBS 仔細(xì)沖洗涂層表面，避免刮傷表面。
涂層表面已準(zhǔn)備好使用。如果保持無(wú)菌狀態(tài)，它們也可以在 2-10°C 潮濕或風(fēng)干的條件下儲(chǔ)存。
3-D 凝膠制備程序
將 1 份冷凍的 10X PBS 或 10X 培養(yǎng)基緩慢加入 8 份冷凍膠原蛋白溶液中，輕輕旋轉(zhuǎn)。
使用無(wú)菌 0.1 M NaOH 將混合物的 pH 值調(diào)節(jié)至 7.0–7.5。仔細(xì)監(jiān)測(cè) pH 調(diào)節(jié)（pH 計(jì)、酚紅或 pH 試紙）。
用無(wú)菌水將最終體積調(diào)整為總共 10 份。
為防止凝膠化，將混合物的溫度保持在 2–10° C。
要形成凝膠，請(qǐng)加熱至 37°C。讓凝膠形成大約 90 至 120 分鐘。
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